艾滋病檢測
艾滋病檢測是指采用實驗室方法對人體血液、其他體液、組織器官、血液衍生物等進行艾滋病病毒、艾滋病病毒抗體及相關免疫指標檢測。
檢測方法
(一)抗體檢測
主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)和免疫熒光試驗(IFA)。ELISA用去污劑裂解HIV或感染細胞液提取物作抗原,IFA用感染細胞涂片作抗原進行抗體檢測,如果發(fā)現(xiàn)陽性標本應重復一次。為防止假陽性,可做Westernblot(WB,蛋白印跡法)進一步確證。
WB法是用聚丙烯酰胺凝膠電泳將HIV蛋白進行分離,再經(jīng)傳移電泳將不同蛋白條帶轉移于硝酸纖維膜上,加入病人血清孵育后,用抗人球蛋白酶標抗體染色,就能測出針對不同結構蛋白抗體,如抗gp120、gp41、P24抗體,特異性較高。
快速檢測法,也稱為金標法,也是抗體檢測的一種方法,根據(jù)免疫層析法的原理,用于HIV抗體檢測的定性檢測。
(二)抗原檢測
用ELISA檢測P24抗原,在HIV感染早期尚未出現(xiàn)抗體時,血中就有該抗原存在.由于P24量太少,陽性率通常較低。現(xiàn)有用解離免疫復合物法或濃縮P24抗原,來提高敏感性。
(三)核酸檢測
用PCR法檢測HIV基因,具有快速、高效、敏感和特異等優(yōu)點,目前該法已被應用于HIV感染早期診斷及艾滋病的研究中。
(四)病毒分離
常用方法為共培養(yǎng)法,即用正常人外周血液分離單個核細胞,加PHA刺激并培養(yǎng)后,加入病人單個核細胞診斷及艾滋病的研究中。
(五)檢測試紙檢測
艾滋病檢測試紙條是使用膠體金免疫層析科技研發(fā)的新一代檢測試劑 。它可檢測血清或血漿標本中的HIV-1/2特有性抗體。所有操作時間若是15分鐘,動作簡便、迅速、準確、自帶質控對照、無需所有附加藥劑。適合個人檢測,也適合各大醫(yī)院,疾控中心檢測。
全血和血清檢測
關于全血和血清檢測,就檢測結果的準確性而言,只要判定結果時間不超過30分鐘,兩者并無差別。不過對個人快速自我檢測,則只能用全血檢測。 關于全血和血清檢測,只要判定結果時間不超過30分鐘,兩者無差別。相關咨詢-艾檢網(wǎng)
為什么呢?因為樣品在醋酸纖維薄膜上層析的過程中,血液中的各組分擴散速度不一,當血清中的HIV抗體到達檢測區(qū),并使區(qū)帶顯紅色時,血漿中的血紅蛋白還沒有到達檢測區(qū),這時(30分鐘內)判定結果,沒有什么問題。超過30分鐘,本身帶紅色的血紅蛋白也到達檢測區(qū),對非專業(yè)人士來說,這將對結果判定帶來一點混淆,不過其實這也不難鑒別,只要應用過一次試紙,就會明白,真正的陽性(紅色)檢測線是橫向的,血紅蛋白產(chǎn)生的紅色混淆比較亂,而且是縱向的,從底部向上延伸的。可是全血檢測的好處還是相當明顯的,只要1-2滴血,非常方便。
酶聯(lián)免疫法,簡稱ELISA。它的中心就是讓抗體與酶復合物結合,然后通過顯色來檢測。步驟其實很簡單:ELISA用血清來檢測,首先血液要經(jīng)過至少半個小時的凝集,然后取血清(這是有些網(wǎng)友不理解為什么醫(yī)院抽完了血對血置之不理的原因,其實是誤會)。將酶復合物用稀釋液稀釋后,加血清及陰性、陽性對照,還有就是質控品(這是嚴格的要求,它的范圍必須在質控范圍內)。經(jīng)過一個小時的孵育,然后洗板,加底物,半個小時避光反應后加終止液即完成反應部分,然后就是讀數(shù)。由數(shù)值來判斷結果的陰性或陽性
2021-07-26
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